1. 成果介绍
利用ELISA、免疫胶体金、建立快速、高通量、精确的转基因生物蛋白检测方法,共同开发了转PAT/BAR基因外源目的蛋白试纸条产品,建立转基因生物分子特征蛋白识别技术体系。这将应用于我国转基因农产品实际检测,为实现我国转基因生物安全管理的总体目标提供技术支撑。
本检测试剂盒采用胶体金标记免疫层析技术,主要用于快速、定性检测植物样本中是否含特异性转抗除草剂基因PAT/BAR蛋白。本产品检测灵敏度为1ng/ml蛋白标准品,比国际同类产品灵敏度高100倍;1-2分钟即可观察到结果(图2),对快速有效地检测植物、食品等农产品的转抗除草剂基因PAT/BAR蛋白,以及对公共卫生应急事件的检测等具有重要意义。本检测试剂盒参加了由农业部、科技部和中国农业科技管理研傲视群雄会等公共举办的“给农业插上科技的翅膀—全国农业科技重大成果展”。
图PAT/BAR金标免疫试纸条
2. 研发背景及市场应用前景
Glufosinate是一种广泛应用的非特异性选择除草剂,某些微生物能够产生一种酶通过对氨基进行乙酰化,从而解毒此效应,这种抗性基因被命名为Bar,名称取自于bialaphos resistance。Bar基因广泛应用于基因工程育种中,也是遗传转化中的标记基因,它使植物抵抗以phosphinothricin为活性成分的除草剂。
开展转基因外源蛋白的检测,包括在转基因植物的研制开发或在对转基因产品进行筛选或安全性评价时,主要的方法有Western、酶联免疫吸附法(ELISA)等。这些方法都受仪器、场地等因素的限制,而且检测时间长,检测成本较高,很难推广应用。因此,实践中需要有一种可快速检测转基因植物中bar/PAT蛋白,且快速检测、操作简便、结果可靠的装置。
PAT/BAR金标免疫快速检测试剂盒主要用于快速、定性检测植物样本中是否含特异性转抗除草剂基因PAT/BAR蛋白,可用于转基因育种单位(科研单位、大学以及生物公司)、检测部门以及种子站等相关单位,年销售量可达40条。随着国家转基因作物的开放,销售量非常巨大。
3. 技术成熟度:已应用
4. 获得的知识产权情况
杂交瘤细胞株、所分泌的单克隆抗体及其在检测bar/PAT蛋白中的应用,201710782130.9,中国发明专利
5.应用情况
目前,本产品已研制成功并进行了商业化销售,其检测灵敏度超越市场现有的同类产品,拥有巨大的商业价值。2015-2018年总销售27000条,总金额为242850元。产品采购方有东北农业大学、河南大学、中国科学院、安徽大学等多个院校及科研单位,以及潍坊鑫哲商贸有限公司和南宁市天地扬生物试剂经营部等企业。